因为实验室中会产生有害有毒的气体，负压实验室要求室内空气压力小于十万空气压力，以此来实现有害有毒气体不会泄露到室外，而只让有毒有害的气体通过指定的管道排放出去。
根据《实验室―生物安全通用要求》(GBl9489-2004)的规定，BSL-3和BSL-4实验室相对室外大气压，污染区为―40Pa，并与生物安全柜等装置内气压保持安全合理压差。保持定向气流并保持各区之间气压差均匀。一般而言，BSL-3和BSL-4实验室由外向内分别是清洁区、工缓冲间、半污染区、Ⅱ缓冲间和污染区，它们的负压值分别是0Pa、-10Pa、-20Pa、-30Pa和-40Pa。ABSL-3和ABSL-4实验室相对室外大气压，污染区为一60Pa，并与生物安全柜等装置内气压保持安全合理压差。保持定向气流并保持各区之间气压差均匀。一般而言，BSL-3和BSI．-4实验室由外向内分别是清洁区、 工缓冲间、半污染区、Ⅱ缓冲间和污染区，它们的负压值分别是0Pa、-10Pa、-25Pa、-40Pa和-60Pa。
负压实验室的建设涉及到工艺布局、气流控制、压力控制、净化系统设置等各个方面。
